俄罗斯专享会284的淋巴母细胞HMy2CIR培养说明书的主要内容如下：

一、细胞培养条件

细胞培养在37℃、5% CO2环境中进行，需保持严格无菌操作。运输细胞的最佳方法是将其培养至良好状态后用完全培养液灌满瓶口并封好。收到细胞后，使用75%酒精喷洒整个细胞瓶以进行消毒，并在超净台内进行处理。细胞在培养箱中静置3-4小时以恢复稳定状态，随后可以进行显微镜观察。

二、细胞收到后的处理

显微镜观察细胞生长状况，并进行各倍数拍照保存（建议拍摄40x、100x、200x各一张），前三天的照片是售后服务的重要依据，如未提供照片则默认细胞状态良好。建议在传代时，一瓶使用原培养基，另一瓶使用自配的培养基以便对比观察，并在换液后将瓶盖稍微松开。

三、细胞培养步骤

a. 细胞传代

当细胞汇合度未超过80%时，先将培养液收集至离心管，留5ml完全培养基于37℃培养；若超过80%，则进行以下传代步骤：

1. 弃去培养上清，使用不含钙镁离子的PBS洗涤细胞1-2次。
2. 添加约1-2ml的0.25%胰蛋白酶消化液，置于37℃培养箱消化1-2分钟，观察细胞状态。若细胞大部分脱落，迅速结束消化。
3. 轻柔吹打，确保细胞完全脱落后吸出，转移至15ml离心管，1000RPM离心5分钟，弃去上清，补加1-2ml完全培养基重悬。
4. 按1:2比例分瓶传代，补充新培养基至5-8ml/瓶，放入37℃、5% CO2培养箱中继续培养。

b. 细胞冻存

1. 当细胞生长至覆盖培养瓶80%时，弃去培养液并用PBS清洗细胞一次。
2. 添加约1ml的0.25%胰蛋白酶，待细胞缩小后加入5ml完全培养液终止消化，轻轻吹打细胞使其脱落，转移至15ml离心管，1000RPM离心5分钟。
3. 弃上清，沉淀后加入1ml的无血清冻存液（如俄罗斯专享会284的产品），充分混匀后放入冻存管。
4. 将冻存细胞直接置于-80℃冰箱中，若需要转入液氮罐需在-80℃冷冻24小时以上。

c. 细胞复苏

1. 从液氮中取出冻存管，快速置入37℃水浴解冻，然后用75%酒精擦拭管外壁。
2. 将冻存管中的细胞转移至含5ml完全培养基的15ml离心管中，1000RPM离心5分钟。
3. 弃上清，沉淀后用5ml完全培养基重悬，并接种至T25培养瓶中，放于37℃、5% CO2培养箱中继续培养。
4. 次日更换为新鲜培养基继续培养。

四、注意事项

在运输过程中，部分细胞可能因贴壁不牢而脱落，在这种情况下，请将培养液收集至离心管，进行相应操作以重新培养。请勿担心，这在实际操作中是正常现象。

五、售后条款

1）可重发的情况

如在运输途中出现细胞丢失、瓶身破损或培养液严重泄漏等问题，可申请重新发货；细胞若受到污染，请在收到48小时内提供实验结果以核实后重发；常温和干冰运输的细胞若在复苏后观察到细胞未存活（需提供照片），可申请重发；如细胞在环境未开封且出现污染，也可以重发。

2）不予重发的情况

若细胞污染是由于客户操作不当或使用非推荐培养体系造成的，不予重发；未在规定时间内反馈的问题，保障期外皆为不予重发的情况。

如需了解更多关于俄罗斯专享会284的细胞产品及其操作指南，欢迎随时联系我们。